lb培养基灭菌后什么时候加氨苄（lb液体培养基什么时候加氨苄）
摘要：
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含氨苄的LB固体培养基怎么配
毫升量：胰化蛋白胨1g，酵母提取物：0.5g，氯化钠：1g，agar：5g，加蒸馏水溶解，高压灭菌20分钟，待液体冷却到55度加入氨苄，摇匀后立刻倒板。
水：1000 mL LB培养基的配制步骤 称取所需的牛肉提取物、酵母粉和NaCl，加入约500 mL的去离子水中，用力搅拌，使其充分溶解。 加入足量的去离子水，使总体积达到1000 mL。
LB培养基的配方如下： 胰蛋白胨 (Tryptone) 10g/L 酵母提取物 (Yeast extract) 5g/L 氯化钠 (NaCl) 10g/L 另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH，使其达到4 (该pH适合使用最广的原核表达菌种 E.coli 的生长)。
配制：100mlLB培养基加入5g琼脂粉。抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置与55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时（手可触摸）加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。
一般LB培养基中卡那霉素的浓度是：一般筛大肠杆菌的氨苄工作浓度50ug/mL，配50mg/mL的，用时稀释1000倍卡那工作浓度30ug/mL，配30mg/mL的，用时稀释10那。
LB培养基配方
LB培养基配方 LB培养基是一种富含营养的基础培养基，适用于大多数细菌的培养。其配方如下：蛋白胨：10g 酵母提取物：5g NaCl：10g 纯水：1000ml 制备方法 将蛋白胨、酵母提取物和NaCl称量后加入1L容量瓶中。
LB培养基（Luria-Bertani medium）是一种经典的细菌培养基，主要成分包括三种：酵母提取物、胰蛋白胨和氯化钠。
LB培养基的配方如下：胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl) 10g/L 琼脂粉15g/L 一定要在温度降下之前加好抗生素，并且倒好板。
成分（g/L） 蛋白胨：0 氯化钠：0 酵母浸出粉：0 pH值 0~4 LB肉汤属于即用型培养基，在生化分子实验中一般用于大肠埃希氏菌的预培菌种的增菌培养。
LB培养基的配方如下：胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl) 5g/L 另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH，使其达到4，然后来培养E-coli。
在Lb的培养基中加入氨苄后,一直放在室温7天,氨苄抗性会消失。
氨苄放置37度的环境中的话，一般17～18个小时效果就不好了。
不用再加青霉素了，因为你整个的培养基都可以倒掉了。LB培养基怎么能在常温保存呢？即使在4°C保存也最多最多保存一个半月，常温的话，放置过夜就不建议再用了。
而且氨苄抗性的原理是质粒编码β-内酰胺酶导致氨苄失活。所以平板筛选时菌落周围氨苄浓度会降低，菌落内部的氨苄浓度则更低。
至24小时。通过查看化学实验培养皿说明，氨苄抗性培养基是一种用于筛选含有氨苄抗性基因的细菌的培养基，氨苄抗性培养基培养时间是16至24小时。
长出来的克隆少和你接种菌种的浓度、活性、和加入抗生素的浓度都有关系；另外一点要注意的就是如果你转染了质粒，那么有些转入的基因可能会导致细菌的生长变慢，也就是说克隆长出快慢还和转染的质粒有关。
转化之后复苏感受态细胞能用加了氨苄的LB培养基吗
1、转化后的感受态细胞在含氨苄的板上出现大量菌苔，可能的原因有以下几点： 氨苄失效：氨苄可能已经分解失效，无法有效抑制细菌的生长。可以尝试做空白对照，如果空白的也很好，那么氨苄失效的可能性就很大。
2、℃，195rpm，震荡培养过夜。次日取菌液4ml接种至含有400mlLB培养基（抗性根据感受态选择）的2L摇瓶中，37℃，200rpm震荡培养约2-3小时。
3、实验结果不能肯定的说明结果是成功的，做实验的阴性对照也很重要，阴性对照必须做出阴性结果。如楼下的网友所说，可能是你的感受态菌被质粒污染了。
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