反转录试剂盒都有什么（反转录试剂盒放室温会坏吗）
摘要：
全式金逆转录试剂盒好，全式金逆转录试剂盒的灵敏度高，可以检测到非常少量的病毒核酸，有助于早期发现HIV感染，可以在相对短的时间内完成检测，有助于提高诊断效率，对于新手来说购买反转录... 本篇目录：
有做RT-PCR不用试剂盒的吗
在武汉疫情初期，中国疾病预防控制中心应用宏基因组学技术，在短时间内完成该病毒的鉴定，并获取了全基因组序列。在病毒全基因组序列公布后，实时荧光逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）试剂被快速研发。
Oligo dt不需要设计，用试剂盒里面的就行。如果你RT的引物想用自己的，那你需要扩增的基因序列应该是明确的吧。
逆转录一般用罗氏的，目前天根的全式金的也挺好用，还方便。如果是用转录出的cDNA做那跟平时就一样了。
小时有点长啊，不都是12小时吗 要高质量的DNA，当然要试剂盒或者CTAB之类的传统方法提取，少不了纯化。如果你只是想做个PCR，那么挑菌落就可以直接PCR。
在同一管中做RT，其实没有什么问题，不需要taq魅加量，taq酶本来就是过量的^-^，(平时做pcr的时候，完全可以再省一些taq酶的，半斤八两 就可以了，我想这肯定再很多贴子里应该都谈到了。Mg就跟不能变了，一变整个体系就变了。
提取RNA,然后做逆转录需要什么试剂及试剂盒?
细胞总RNA的提取 1）、6孔板细胞（CNE-2）汇合度为90-100%时，取出无菌室，去其上清，用PBS洗两次后，每孔加TRIZOL试剂（Gibco公司）1 ml，摇匀，无菌罩内消化3-5分钟（观察：液体变粘稠，细胞脱壁）。
然后茎环法的经典即ABI的探针法定量试剂盒。
总RNA的提取。 cDNA第一链的合成（Reverse Transcription）：如今试剂公司有多种cDNA第一链试剂盒出售，其原理基本相同，但操作步骤不一。
所以，提取RNA颇为不易。加之RNA的不均一性，要将所有的RNA（rRNA、tRNA、mRNA）完全提出，更加有挑战性。
反转录试剂盒哪家的比较好
全式金逆转录试剂盒好。全式金逆转录试剂盒的灵敏度高，可以检测到非常少量的病毒核酸，有助于早期发现HIV感染，可以在相对短的时间内完成检测，有助于提高诊断效率。
对于新手来说购买反转录试剂盒是比较理想的，买一个kit看看说明书操作就可以了。推荐两款kit TAKARA和HaiGene，这两款试剂盒都能对RNA样品中的gDNA有效去除，因此对RNA质量的要求不高。
takara的和东洋纺的都还不错。反转录效率还行，而且takara用的RNA量较少。
TUREscript 1st Strand cDNASynthesis Kit（PC18），一个是 2 x SYBR Green qPCR Mix（PC33）。首先由反转录第一链试剂盒合成 cDNA，然后以 cDNA 做模板用 2 x SYBR Green qPCR Mix 进行荧光定量 PCR 扩增。
micRNA反转录可以用哪些种类的反转录酶,或哪些试剂盒
1、加尾法是采用加A酶先对mirna进行加尾，然后再用带oligodt的引物反转录，他的反转录引物是通用的，一次反转录可以获得所有miRNA的cdna，效率高。
2、看你要提什么RNA了，如果是总RNA建议用TRIZOL法，反转录用一步法或两步法反转录试剂盒，如果你要做双链cDNA，接下来还要进行第二条链合成，有双链cDNA合成试剂盒，也有这两步都包括的试剂盒。
3、M-MLV酶的RNase H活性比另外一种常用的逆转录酶Avian Myeloblastosis Virus(AMV)弱，因此更适合于反转录长链RNA。M-MLV逆转录酶的反应活性小于AMV逆转录酶，因此产生相同量的cDNA需要更多分子的M-MLV逆转录酶。
4、①如果是普遍反转录引物，则不需要，也就是反转录用一种引物将RNA全部反转成cDNA 然后定量的时候再使用miRNA和对应的普通基因各自的定量引物。
5、多反转录酶都具有多种酶活性，主要包括以下几种活性 。①DNA聚合酶活性；以RNA为模板，催化dNTP聚合成DNA的过程。此酶需要RNA为引物，多为色氨酸的tRNA，在引物tRNA3′－末端以5′→3′方向合成DNA。
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