10xbuffertango是干什么的（10*buffer是什么意思）

摘要： 4、Xbal和XhoI双酶切的共用Buffer是什么?...

本篇目录：

• 1、...想请问一下buffer建议中2XTango是什么意思啊?
• 2、求助!刚刚开始做分子实验,但是转化的时候老不长菌,求大神帮我分析一下...
• 3、...反应体系是什么?或者这两种酶在体系中的比例是多少?请指教!_百度...
• 4、Xbal和XhoI双酶切的共用Buffer是什么?Fermentas公司的酶!
• 5、求分子克隆具体实验步骤一份~~多谢各位大侠啦~

...想请问一下buffer建议中2XTango是什么意思啊?

1、而且还可以看到每一种酶在此buffer中的活性，由于XbaI在2XTango中活性是50-100%，所以建议用2倍的XbaI。 另外，一定要注意XbaI是否有甲基化。

2、反应体系应该指的是，两种酶同时使用时，应该用的buffer系统，且每一种酶的用量，DNA的用量，以及保证酶量不超过总反应体积的1/10，即20ul体系中，两个酶的总量不能超过2ul。

3、buffer tango 是fermentas公司的一种较为通用的酶切buffer。fermentas的buffer有buffer O、buffer R 、buffer tango 、buffer G、buffer B 5种，依照酶的不同而定。

4、基本切不开了。必须得顺序切。非要一起切的话，这两个酶的用2Xtango buffer最理想。可以尝试先切EcoRI，反正37C对MseI的活性损失也不大，反应一段时间后，再升到高温，专门切MseI。试试看切的怎么样。

求助!刚刚开始做分子实验,但是转化的时候老不长菌,求大神帮我分析一下...

经供参考：转化未成功；感受态有问题（如果感受态有问题可以用无抗性的培养基多对照涂平板）。

片段略长了些，增加了连接的难度，建议连接时控制一下载体和片断的摩尔比例1：3～1：10，载体的量尽量少些。

对于以质粒为载体的重组分子而言，分子量大的转化效率低，实验证明，大于30kb的重组质粒将很难进行转化。

有上述现象的变化不一定就是化学变化，例如电灯发光、放热是物理变化，氧气由气态变成液态时颜色要由无色变成淡蓝色，是物理变化，水在刚开始加热时，就有气泡逸出，以及泥土放到水里形成沉淀都是物理变化。

...反应体系是什么?或者这两种酶在体系中的比例是多少?请指教!_百度...

限制性内切酶是一种特殊的酶，它可以切割DNA分子的特定位置，并在这些位置形成切口，从而帮助进行DNA重组和操作。在配置酶切体系时，限制性内切酶的用量应该控制在适当的范围内，通常不超过整个体系的1/10。

在一个典型的PCR反应体系中需加入：适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg2 和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃变性1min，引物与模板40～60℃退火1min，72℃延伸2min。

。模板DNA的变性，两条链解开。2。引物模板退火，二者碱基配对 3。DNA聚合酶以四种核甘酸为底物，在引物引导下合成和模板互补的DNA新链。4。重复此过程。

Xbal和XhoI双酶切的共用Buffer是什么?Fermentas公司的酶!

1、而且还可以看到每一种酶在此buffer中的活性，由于XbaI在2XTango中活性是50-100%，所以建议用2倍的XbaI。

2、buffer tango 是fermentas公司的一种较为通用的酶切buffer。fermentas的buffer有buffer O、buffer R 、buffer tango 、buffer G、buffer B 5种，依照酶的不同而定。

3、质粒自连说明双酶切没有切开。不知道你的buffer是怎么选的，如果两种酶在buffer中的活性不同的话，活性较低的那个可以加大酶量，同时延长酶切时间，或者更换buffer。条件需要自己摸索。

4、NEB的话，BamHI是用buffer2，3，4 ，酶活性都是100%，SacI是buffer1，4，酶活性是100%。所以双酶切的话用buffer 4 好了。

5、不同公司的酶和buffer命名和特性是不完全一样的。像takara公司的内切酶有一个双酶切的列表，列出了每两种酶双酶切最适用的buffer。像NEB公司的话，酶4种buffer中的活性都列出来了，选一个两种酶活性都高的就可以了。

6、酶2 0.5ul buffer 去Takara产品目录查双酶切buffer表，按照那个倍数加，有时候需要BSA 水补足 20ul 30或37度，1-5小时都可以。有个别酶需要55度。注意，酶别加多了，甘油浓度过高影响酶的活性。

求分子克隆具体实验步骤一份~~多谢各位大侠啦~

1、步骤：DNA片段的制备、载体的选择、片段与载体连接。在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。

2、PCR在分子克隆和DNA分析中有多种用途，下面小编就向大家介绍PCR实验方法步骤：方法 1/4 在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。

3、（1）包括有目的基因在内的DNA片断插入另一个DNA分子（克隆载体，通常是环状的），形成重组DNA分子。（2）重组DNA分子通过转化或其他类似的方法被导入受体细胞。大肠杆菌是使用较多的受体细胞。

4、提取DNA基因组或则mRNA（可用试剂盒完成，一般问题都能解决）。设计引物，PCR扩增目的片段。选择合适质粒载体，进行酶连接，构建亚克隆子（有商品化质粒可供选择）。

5、重组DNA技术主要包括四个步骤：提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。

6、测定从上面步骤4取出的3μl反应物中放射性活度，并按分子克隆实验指南》第三版附录8所述方法测定1μl第二链合成产物中能被三氯乙酸沉淀的放射性活度。 用下面公式计算第二链反应中所合成的cDNA量。

到此，以上就是小编对于10*buffer是什么意思的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。