DNA条带不拖尾说明什么(dna 条带)
本篇目录:
- 1、条带不拖尾,试样在电泳后紫外线下不呈现荧光的原因
- 2、如何利用分光光度计测量dna样品的浓度和纯度?还有其他方法?他们之间...
- 3、DNA电泳时有很长的拖尾是什么原因?
- 4、DNA拖尾现象是什么原因
- 5、提取出的植物DNA有拖尾现象是怎么回事
条带不拖尾,试样在电泳后紫外线下不呈现荧光的原因
1、因为EB染色的原理是EB插入到DNA的碱基对之间,然后在紫外光照射下激发发光。所以DNA含量越高,而且DNA链越长的条带就会越亮。
2、博凌科为-为你解加样口很亮是因为你提的RNA/DNA不纯,里面含有蛋白质,有拖尾说明你的RNA有降解,重新提。
3、退火温度 以及Mg含量过高、dNTP过多等也可能造成拖尾。
如何利用分光光度计测量dna样品的浓度和纯度?还有其他方法?他们之间...
一般用微量分光光度计比较快速简便,DNA浓度会直接在软件上显示,A260 / A280的比值用于评估样品的纯度, 纯净的样品比值大于8,低于0。较纯净的核酸A260/A230的比值大于0。
首先,分光光度计测量的样品必须是均一的,摇匀后再测量结果会准确些。它是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。
用到的技术方法有:琼脂糖凝胶电泳(确定片段大小),使用紫外分光光度计测定基因组DNA溶液的OD值(浓度和纯度的测定,OD260/OD280应该在8左右,高了表明有RNA污染,低了表明有蛋白质污染)再看看别人怎么说的。
实验步骤 将制备的DNA悬浮溶解于TE缓冲液中[pHO, 1Ommo1/L的Tris缓冲液,内含〈1mmol/L EDTA〉]或悬浮溶解在灭菌水中(依据DNA含量加水)。
两种方法各有优劣。电泳法 更直观,如果你有DNA Maker,并且知道Maker的浓度,就可以使用一维条带 分析软件 如Quantity One分析样品中DNA的含量,而且可以很直观地了解目的DNA的纯度、大小等特性。
第一步,知道你所需要测量物质的特征吸收波长是多少?这个可以在国家标准、行业标准或其他相关标准或方法。
DNA电泳时有很长的拖尾是什么原因?
1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。电泳体系的问题:(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液。
2、由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物过多。
3、一般大分子量是会有些拖尾,但是不会这么严重。可能有以下一些原因:电泳电压太高;缓冲液放置太久;凝胶质量不理想(对你这个结果而言这种可能性不太大);凝胶浓度偏高。
4、有可能是以下原因:电压过大;缓冲溶液调子浓度过高;梳子深度;4上样量过多;酶切不完全;DNA发生了降解。
5、dna浓度太高,导致跑起来有拖带;含有蛋白等杂志,导致拖带。当然可能还要其他未知原因。
6、主要原因可能有以下几点:DNA上样量是否过大,可适当减少上样量;电泳参数的设置是否合适,可适当调整电压及胶浓度;产物是否特异,如是否存在非特异性产物等。
DNA拖尾现象是什么原因
1、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。电泳体系的问题:(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液。
2、由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物过多。
3、有可能是以下原因:电压过大;缓冲溶液调子浓度过高;梳子深度;4上样量过多;酶切不完全;DNA发生了降解。
4、拖尾的出现一般就是DNA已经降解,不过在主带明显的前提下,拖尾并不会影响一般的PCR扩增。
5、现在实验室大多用的是提取试剂盒,如果自制溶液碱性过强会有可能出现拖尾现象,蛋白沉降步骤不完全也会有可能导致基因组dna降解出现拖尾现象。类似于溶液方面的问题一般比较容易排除,而且比较容易改正。
6、主要原因可能有以下几点:DNA上样量是否过大,可适当减少上样量;电泳参数的设置是否合适,可适当调整电压及胶浓度;产物是否特异,如是否存在非特异性产物等。
提取出的植物DNA有拖尾现象是怎么回事
1、拖尾的出现一般就是DNA已经降解,不过在主带明显的前提下,拖尾并不会影响一般的PCR扩增。
2、如果没有处理过的话,可能你的样品里有大量的RNA存在,显得电泳拖尾,不一定是你的DNA降解严重。另外,电泳图中没有看到明显的DNA条带存在,可能的原因是:DNA真的降解了;最后提取出来的DNA溶液里DNA浓度太低。
3、原因有以下: 可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。
4、首先,你的smear带跟基因组DNA离得很远,而且从marker来看,那些是小分子,很有可能就是RNA,所以这个对于你后续的工作是没有太大的影响的。
到此,以上就是小编对于dna 条带的问题就介绍到这了,希望介绍的几点解答对大家有用,有任何问题和不懂的,欢迎各位老师在评论区讨论,给我留言。