为什么酚氯仿异戊醇（酚氯仿异戊醇提取DNA的原理）

摘要： 1、加入异戊醇能降低分子表面张力，所以能减少抽提过程中的泡沫产生，一般采用氯仿与异戊酵为24：1之比，也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25：24：1，2、氯仿：加速有机相与液相分层，...

本篇目录：

• 1、为什么用苯酚氯仿异戊醇提取DNA,离心后分层,上层是深绿色下层是浅绿色...
• 2、苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理,以及这三者的作用是什么?
• 3、核酸分离过程中酚、氯仿、异戊醇的作用是什么?
• 4、苯酚:氯仿:异戊醇为什么要25:24:1?
• 5、配好的酚氯仿异戊醇溶液为什么会分层?

为什么用苯酚氯仿异戊醇提取DNA,离心后分层,上层是深绿色下层是浅绿色...

1、加入异戊醇能降低分子表面张力，所以能减少抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24：1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25：24：1。

2、氯仿：加速有机相与液相分层。同时，在抽提取过程会加少许异戊醇，来减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡，降低蛋白表面张力，从而减少气泡产生。

3、上层是水。氯仿：使有机相和水相易分层，增加核酸得率，同时可除去脂类。 说明：从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯酚/氯仿/异戊醇（25 ： 24 ： 1)。

苯酚、氯仿、异戊醇抽提DNA的原理,以及这三者的作用是什么?

正确答案：酚--是蛋白质变性，抑制DNA酶的降解作用；氯仿--除去脂类，同时加速有机相与水相的分层；异戊醇--降低表面张力，从而减少气泡的产生。

加入异戊醇能降低分子表面张力，所以能减少抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24：1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25：24：1。

在抽提DNA时，为了混合均匀，必须剧烈振荡容器数次，这时在混合液内易产生气泡，气泡会阻止相互间的充分作用。加入异戊醇能降低分子表面张力，所以能减少抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24：1之比。

和DNA分离.EDTA是DNA酶的抑制剂，防止细胞破碎后DNA被降解.Tris/HCL是作为缓冲的，DNA在这一体系中呈稳定态；PVP、抗坏血酸钠用来防止氧化，氯仿、异戊醇是去除蛋白，酒精是沉淀DNA，因为DNA容易水，不溶于酒精。

核酸分离过程中酚、氯仿、异戊醇的作用是什么?

1、加入异戊醇能降低分子表面张力，所以能减少抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24：1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25：24：1。

2、在基因组DNA提取过程中常用酚、氯仿、异戊醇试剂，它们各有什么作用？正确答案：酚--是蛋白质变性，抑制DNA酶的降解作用；氯仿--除去脂类，同时加速有机相与水相的分层；异戊醇--降低表面张力，从而减少气泡的产生。

3、氯仿比重大，能加速有机相与水相分层，减少残留在水相中的酚，同时氯仿具有去除植物色素和蔗糖的作用。

4、通常氯仿里面会加少量异戊醇（1/25），减少蛋白质在变性过程中由于震荡产生的泡沫，影响后续操作，不过个人经验感觉加不加没什么太大区别，也许是我的样品里蛋白不多吧 异丙醇是沉淀核酸用的，作用和乙醇一样。

苯酚:氯仿:异戊醇为什么要25:24:1?

1、加入异戊醇能降低分子表面张力，所以能减少抽提过程中的泡沫产生。一般采用氯仿与异戊酵为24：1之比。也可采用酚、氯仿与异戊醇之比为25：24：1。

2、酚是强烈的蛋白质变性剂，能有效使蛋白质变性而除去，氯仿有强烈的脂溶性，去除脂类杂质，本身酚：氯仿：异戊醇=25：24：1的主要作用是抽提蛋白质。氯仿-异戊醇能使蛋白质变性，从而将蛋白质从溶液中析出。

3、苯酚：氯仿：异戊醇为什么要25：24：1？ 抽提DNA去除蛋白质时，怎样使用酚与氯仿较好？酚与氯仿是非极性分子，水是极性分子，当蛋白水溶液与酚或氯仿混合时，蛋白质分子之间的水分子就被酚或氯仿挤去，使蛋白失去水合状态而变性。

4、减少残留在水相中的酚，同时氯仿具有去除植物色素和蔗糖的作用。在酚/氯仿抽提核酸提取液时，需要振摇，为防止起泡和促使水相与有机相的分离，再加上一定量的异戊醇（酚：氯：异戊醉=25：24：1）。

5、：氯仿异戊醇就叫氯仿异戊醇，没啥特殊的名字，不过其作用就是萃取脂溶性物质，你爱叫什么就叫什么（你给的三个名字不都一个意思么？）。

配好的酚氯仿异戊醇溶液为什么会分层?

1、溶液分层。酚氯仿异戊醇分层用溶液层。分层是指钢板与钢管轧制时形成的内部缺陷。通常由于钢坯质量问题(缩孔残余、气泡、夹杂、疏松）在轧制钢板和钢管时未能焊合而造成。可分离成两层或多层，分层面积大小不一。

2、按道理来讲应该是蛋白了，一般用酚氯仿抽提DNA时最后上层是含DNA的水相，中间是蛋白，下层是有机溶剂。对比你说的结果，应该是这样的。

3、pH在4左右，也提的不错。pH只是影响了DNA的溶解度而已。异戊醇这个东西真的是可加可不加。一般都是酚氯仿等体积混合抽一遍，再氯仿抽一遍。

到此，以上就是小编对于酚氯仿异戊醇提取DNA的原理的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。