为什么后加巯基乙醇（巯基乙醇加多了有影响吗）
摘要：
2、在酶制剂提取液中加入什么可以减少巯基氧化?... 本篇目录：
在胚胎干细胞的培养中加入β-巯基乙醇的作用
培养细胞时氧气会影响细胞状态。氧气是一种氧化剂，浓度太高，会损伤细胞的，可以加入抗氧化剂如巯基乙醇。
加入β-巯基乙醇的作用是作为一种强还原剂，中和掉细胞培养基中积累的氧自由基，这样可以使得细胞分裂到很高的密度而不死亡，从而便于进行细胞增殖实验。
βME通常用于二硫键的还原，可以作为生物学实验中的抗氧化剂。它被广泛使用的原因是它的羟基使它能够溶解于水中，并且降低它的挥发性。由于具有较低的蒸汽压，它的难闻的情况比起恶臭的硫醇要好得多。
原生质体制备时会用β-巯基乙醇进行预处理。β-巯基乙醇是一种还原剂，其主要作用是降低氧对细胞产生的氧化损伤。防止某些生物活性物质的活性基团及酶的活性中心受到破坏。
巯基乙醇保护醛基 2-巯基乙醇，又称为β-巯基乙醇，是一种有机化合物，分子式为C2H6OS，为无色挥发性液体，具有较强烈的刺激性气味。
最主要的作用：抗氧化。巯基乙醇 能够提供还原力，保护 二硫键 ，从而使蛋白质不被氧化掉而失活。此外在骨髓间充质干细胞向 神经细胞 诱导培养时使用 2-巯基乙醇 可以进行预诱导。
在酶制剂提取液中加入什么可以减少巯基氧化?
1、为了防止蛋白质的二硫键在纯化过程中被氧化，可以加入蛋白纯化缓冲液。常用蛋白纯化缓冲液包括氨丁三醇与盐酸混合液（Tris缓冲溶液）和磷酸盐缓冲溶液。研究蛋白质，首先要得到高度纯化并具有生物活性的目的物质。
2、防止二硫键被氧化，从而保护蛋白不被破坏。 因为细胞培养的环境和机体原生环境有差别。机体内有多重保护机制，保护蛋白不被自由基氧化，例如谷胱甘肽等。
3、因为一般蛋白质都含有相当数量的巯基，有些巯基常常是活性部位的必需基团，若提取液中有氧化剂或与空气中的氧气接触过多都会使巯基氧化为分子内或分子间的二硫键，导致酶活性的丧失。在提取液中加入少量巯基乙醇或半胱氨酸以防止巯基氧化。
4、b0S！}0U6|9k/l！vvg1~/@防止酚类化合物被氧化的方法：v；y，a4k7n/Z还原剂法：一般在提取缓冲液中加入(-巯基乙醇、二硫苏糖醇(DTT)或半胱氨酸来防止酚类物质被氧化，有时提取液中(-巯基乙醇的浓度可高达2%。
5、因为半胱氨酸侧链的巯基反应性能很高，在微碱就可以发生解离，而二硫键氧化剂还原剂都可以打开，巯基乙醇可以使二硫键还原成2R-SH，和一个稳定的结构，使平衡向右方移动。这时巯基很不稳定，空气就可以使它氧化成二硫键。
提rna时必须加入巯基乙醇吗
NaCl，2%巯基乙醇（V/V，使用前加入）。由于在高温灭菌条件下，Tris-HCl要和DEPC发生反应，所以配RNA提取缓冲液时直接用DEPC 处理的水配制即可。
LY中要加入beta巯基乙醇，抑制RNase，否则RNA极易降解。我们做液氮研磨则是先取样品，研磨，研磨成粉之后称取合适的质量，然后加裂解液，充分混合后离心取上清。你看你们那里的条件选择合适的做法吧。
在研磨过程中要不断添加液氮使组织保持冷冻状态，最后加入1mL单相裂解液裂解组织细胞，再转移到5 mL离心管。RNA提取 (1)样品加入单相裂解液后，室温放置5 min，使样品充分裂解。
beta-巯基乙醇是还原剂，可以还原蛋白高级结构中的二硫键，解开蛋白的高级结构，有一些裂解液中加入beta-巯基乙醇以后，裂解液的保质期会变短。
RNA提取步骤及注意事项（仅供参考）：实验步骤如下：取50—100mg的组织，加入1ml Trizol试剂，用匀浆器打匀(Trizol先放于冰上)。将匀浆室温放置5min。加入200μl氯仿，剧烈震荡混匀30s，冰上静置3min。
CTAB提取RNA缓冲液为：2% CTAB(W/V)，2% PVP(W/V)，25 mmol/L EDTA，100 mmol·L-1 Tris-Cl pH 0，0 mol·L-1 NaCl， 0.5 g·L-1 Spermidine（亚精胺）。灭菌后加入2%（V/V）-巯基乙醇。
蛋白透析过程中为什么要加巯基乙醇,是都要加吗
保持蛋白质的二级结构。蛋白中如果有二硫键存在的话，会容易被氧化断开，有了巯基乙醇（还原性的物质）就可以免除这一隐患。祝您早日康复。
防止二硫键被氧化，从而保护蛋白不被破坏。 因为细胞培养的环境和机体原生环境有差别。机体内有多重保护机制，保护蛋白不被自由基氧化，例如谷胱甘肽等。
不被氧化。巯基乙醇是有机化合物。提蛋白时巯基乙醇是该反应的重要因素需要氧化，因此加少了会提蛋白不被氧化。蛋白质（protein）是一种复杂的有机化合物，是人体的必须营养素。
是。为了达到更好的RNase抑制效果，往往会在裂解液中额外加入巯基乙醇。巯基乙醇具有较强的挥发性，为更安全的提取RNA。RNase活性的抑制效果决定了RNA提取的完整性。裂解液中的变性剂，能够使蛋白变性、抑制RNase的活性。
巯基乙醇是抗氧化剂，有效地防止酚氧化成醌，避免褐变，使酚容易去除基因组DNA。
此时的蛋白是变性的，一般我们为后面实验考虑，通常都在4度PBS中透析复性，显微镜；但无论复性还是不复性，用考马斯亮兰法测蛋白含量都是没有影响的。
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