tmb显色加盐酸终止为什么（tmb显色的原理）
摘要：
1、酶联免疫诊断试剂盒的底物A和B分别什么作用?... 本篇目录：
- 1、酶联免疫诊断试剂盒的底物A和B分别什么作用?
- 2、tmb显色反应原理
- 3、为什么说盐酸可以终止蛋白酶水解酪蛋白的反应
- 4、tmb显色什么时候终止
- 5、呋喃唑酮检测试剂盒的检测原理是什么呢?
- 6、双抗夹心法elisa为什么要加终止液
酶联免疫诊断试剂盒的底物A和B分别什么作用?
1、酶联免疫诊断试剂盒（上海科华的试剂盒）的底物A就是显色剂A（含过氧化氢）为供氢体（DH2），底物B就是显色剂B（含TMB），用于显色。
2、试剂盒 简介：试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
3、本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代真菌毒素检测产品，操作时间短 于60min，能最大限度地减少操作误差和工作强度。原理：三方圆利用竞争ELISA方法，在酶标板微孔上预包被羊抗鼠抗体。
tmb显色反应原理
显色反应是将试样中被测组分转变成有色化合物的化学反应。在无机分析中，很少利用金属水合离子本身的颜色进行光度分析，因为它们的吸光系数值都很小。一般都是选适当的试剂，将待测离子转化为有色化合物，再进行测定。
tmb颜色反应检测羟基自由基的产生，其原理是羟基自由基可以使tmb发生颜色反应(由无色变为蓝色或黄色)。羟基自由基使得探针发生显色反应，会使溶液从无色变成黄色或蓝色，其对应特征峰的吸收值会越来越高。
纳米酶催化h2o2使得TMB显色，不加过氧化氢就能使TMB显色呈绿色。纳米酶是一类既有纳米材料的独特性能，又有催化功能的模拟酶。
含硫蛋白测定的原理是采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。往预先包被人金属硫蛋白捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。
为什么说盐酸可以终止蛋白酶水解酪蛋白的反应
属于胶体范围。在蛋白质中加入无机盐（如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等），会吸引大量水分子与这些无机盐离子水合，于是蛋白质表面暴露出来的疏水性区域增加，彼此靠著疏水性作用力结合，而从溶液中沉淀，这种作用便称为盐析。
蛋白质在碱的作用下，水解后氨基酸会消旋，但色氨酸稳定。酸法水解由于后续的酸液对环境污染，水解产物会有异味；碱法水解则会使L型氨基酸变成D型，且两种水解方法都不存在专一性，因此酶法水解成为趋势。
①激活胃蛋白酶原，并为胃蛋白酶提供适宜的酸性环境。②使食物中的蛋白质变性，而易于消化。③杀死随食物入胃的细菌。④与钙和铁结合，促进其吸收。⑤盐酸进入小肠可促进胰液、胆汁和小肠液的分泌。
tmb显色什么时候终止
1、根据个人实验需要，在室温15-25℃或37℃下避光温育10-30分钟或更长时间，直至显色至预期深浅。终止：加入等体积的1M盐酸或硫酸溶液终止反应，孔中反应液由蓝色变为黄色。读数：终止反应后30分钟内在450nm处测定吸光值。
2、OPD底物显色一般在室外温或37℃反应20-30分钟后即不再加深，再延长反应时间，可使本底值增高。OPD底物液受光照会自行变色，显色反应应避光进行，显色反应结束时加入终止液终止反应。
3、℃ 30分钟可使HRP的底物催化反应完全，为使弱阳性样本孔能有充分的显色，建议在37℃下反应25～30分钟后，终止反应比色测定。
4、TMB（3，3-二甲基联苯胺）和 HRP（辣根过氧化物酶）显色原理都是基于化学反应产生颜色变化来检测目标物质。这两种方法在实验中广泛应用，例如酶联免疫吸附实验（ELISA）和化学发光法（ECL）。
呋喃唑酮检测试剂盒的检测原理是什么呢?
检测原理：待测药物成分与金标记的抗体特异性结合，抑制了抗体与T线上抗原的特异性反应，使T线颜色变浅或者不显色，通过T线和C线的颜色对比，达到检测目的。整个检测过程一般不超过40分钟，适用于现场及实验室快速检测。
呋喃唑酮代谢物快速检测试剂卡主要检测组织。该快速检测卡具有方便、快速、准确、灵敏等特点，适用于现场大批量样品筛选检测以及基层单位执法监督的使用。
呋喃唑酮几乎不溶于水和乙醇，呋喃西林难溶于水，微溶于乙醇，呋喃妥因几乎不溶于水，微溶于乙醇。
但近来的科学研究表明，三方圆硝基呋喃类药物及其代谢物可以使实验动物发生癌症和基因突变，因此中国、欧盟、WHO等众多国家和组织禁止在食用动物中使用硝基呋喃类药物。
美正的呋喃唑酮代谢物快速检测试纸条是可快速检测组织中呋喃代谢物残留，适用于企业、检测机构、监督部门的现场快速检测，适用样本：水产组织。
双抗夹心法elisa为什么要加终止液
双抗体夹心法，其基本原理是将定量的包被抗体以物理吸附的方法固定于微孔板表面，然后加入待检标本，通过加入检测抗体，酶标记第二抗体后用TMB底物显色，微孔板中颜色的深浅与待测物的浓度呈正相关。
包被：用0.05M PH牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。
终止液是2mol/L的H2SO4，将酶破坏，蛋白变性，从而改变颜色：由蓝变黄。
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