folin酚试剂为什么后面加入（folin酚试剂原理）

摘要： 3、folin-ciocalteu测定总酚含量是有沉淀生成时怎么回事,反应中加入碳酸钠......

本篇目录：

• 1、福林酚法测定蛋白含量
• 2、怎样做Folin-酚法测双缩脲反应?
• 3、folin-ciocalteu测定总酚含量是有沉淀生成时怎么回事,反应中加入碳酸钠...
• 4、lowry法测蛋白质含量
• 5、福林酚试剂变绿可以滴加溴水吗
• 6、...要和福林酚先反应三分钟再添加碳酸钠?为什么添加顺序不一样,结果完...

福林酚法测定蛋白含量

原理：蛋白质与福林酚试剂反应，生成深蓝色复合物。蓝色的深浅与蛋白质含量成正比。可用分光光度计于500nm波长下进行测定。与标准曲线对照，而确定蛋白质含量。

浓度较低的尿素（0.5%），硫酸纳（1%），硝酸纳（1%），三氯乙酸（0.5%），乙醇（5%），乙醚（5%），丙酮（0.5%）等溶液对显色无影响，但这些物质浓度高时，必须作校正曲线。

，在一定浓度范围内，蓝色化合物的蓝色深浅与蛋白质浓度成正比。故通过测定相应浓度梯度的蛋白质标准溶液吸光度可依其作出标准由线，以此绘制的标准有线和供试品中蛋白质溶液吸光度可求出供试品中蛋白质的含量。

福林-酚法是双缩脲法的发展，包括两步反应：(1)在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质—铜络合物。

呈色强度与蛋白质含量成正比，是检测可溶性蛋白质含量最灵敏的经典方法之一。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即Folin—酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。

怎样做Folin-酚法测双缩脲反应?

1、，蛋白质分子中含有的肽键在碱性条件下可以与Cu2+整合形成蛋白质-Cu2+复合物，即发生双缩脲反应。

2、folin—酚试剂法。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的，只是加入了第二种试剂，即folin-酚试剂，以增加显色量，从而提高了检测蛋白质的灵敏度。

3、第一步相当于双缩脲反应，在碱性条件下蛋白质中的肽键与Cu2+作用生成络合物；第二步是基于Folin试剂(磷钼酸和磷钨酸试剂)在碱性条件下极不稳定，易被酚类化合物还原生成钼蓝和钨蓝混合物 (呈蓝色反应)。

4、Bradford法测定蛋白质浓度（一）实验原理双缩脲法（Biuret法）和Folin—酚试剂法（Lowry法）的明显缺点和许多限制，促使科学家们去寻找更好的蛋白质溶液测定的方法。

5、Lowry法最早是由Lowry确定蛋白质浓度测定的基本步骤，以往在生物化学领域中广泛应用。Lowry法的显色原理是根据双缩脲反应，蛋白质中的肽键在碱性条件下与Cu2＋反应，生成紫红色Cu＋复合物。

6、这个测定法的优点是灵敏度高，比双缩脲法灵敏得多。缺点是费时间较长，要精确控制操作时间，标准曲线也不是严格的直线形式，且专一性较差，干扰物质较多。

folin-ciocalteu测定总酚含量是有沉淀生成时怎么回事,反应中加入碳酸钠...

一般来说，福林酚法是通过加入福林酚与样品中的总酚反应来测定总酚含量的。在此过程中，如果将碳酸钠直接加入样品中，则会使福林酚与碳酸钠发生反应，从而影响总酚测定的准确性。

l，此液即为folin酚试剂。将其置于棕色试剂瓶内，保存在冰箱中。用前稀释2倍。

Folin-Ciocalteu（福林-西奥卡特）试剂即Folin-酚试剂中的试剂Ⅱ。（不包括用氢氧化钠标准滴定溶液滴定）滤液应呈金黄色，如呈绿色，弃去。置于冰箱中。使用时，1 体积用2 体积水稀释。

如果金属离子的水解程度不大或不水解，则会生成碳酸盐沉淀，如碳酸钙、碳酸钡。如果金属离子的水解程度稍大，则会生成碱式碳酸盐沉淀，如碱式碳酸铜。如果金属离子的水解程度非常大，则会生成氢氧化物沉淀，如氢氧化铁。

lowry法测蛋白质含量

1、福林酚法，也称为Lowry法，是一种在生物学和生物化学中经常使用的蛋白质定量方法。 原理 福林酚法测定蛋白质含量的原理主要基于蛋白质的肽键与碱性溶液（如碳酸钠）反应形成碱性氨基酸，然后加入福林酚试剂。

2、这种溶液蓝色的深浅与蛋白的含量成正相关，所以可以用于蛋白质含量的测定。

3、此外，所测的蛋白质样品中，若含有酚类及柠檬酸，均对此反应有干扰作用。

4、可能存在干扰物质，如还原物质、酚类、枸橼酸、硫酸铵等，详见药典四部0731蛋白质含量测定Lowry法中第二种方法，通过将蛋白质沉淀来去除干扰。

5、在一定范围内其颜色深浅与蛋白质浓度呈正比，以蛋白质对照品溶液作标准曲线，采用比色法测定供试品中蛋白质的含量。本法灵敏度高，测定范围通常可达20250g。

6、lowry法测蛋白时，蛋白溶液要经过显色处理，而显蓝色，而蓝色对650nm的波长的光吸收最强。

福林酚试剂变绿可以滴加溴水吗

其中的钨酸钠与强酸(氢氟酸除外)反应生成不溶于水的黄色钨酸，因为溴水中有溴化氢（强酸），所以会使钨酸钠反应生成黄色物质。冷却后变绿的原因是黄色钨酸沉淀分解，钨酸钠与钼酸钠和溴水中的成分发生颜色反应，致使出现绿色。

ml蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000ml，过滤。滤液呈微绿色。吸取10 ml 1 mol/ ml的na0h溶液，放入100 ml锥形瓶内，加入2滴酚酞指示剂，用上述滤液滴定。

毫升蒸馏水及数滴液体溴，开口继续沸腾15分钟，以便驱除过量的溴。冷却后溶液呈黄色（如仍呈绿色，须再重复滴加液体溴的步骤）。稀释至1升，过滤，滤液置于棕色试剂瓶中保存。

以驱除过量的溴，冷却后滤液呈黄绿色(如仍呈绿色，需再重复滴加溴水的步骤)，加去离子水定容至1000mL，过滤，滤液置于棕色试剂瓶中，贮于冰箱中可长期保存备用。此溶液使用时可按1：3比例用去离子水稀释。

冷却后加入硫酸锂(LI2SO4·H2O)150g，水50Ml，溴水2～3滴，不用回流装置开口煮沸15Min，以释放出过量的溴。

...要和福林酚先反应三分钟再添加碳酸钠?为什么添加顺序不一样,结果完...

1、·NaHCO3+2HCl=NaCl+H2O+CO2 现象不同原因：盐酸过量时先将碳酸钠转换成为碳酸氢钠，再与盐酸反应产生二氧化碳。而碳酸钠过量时直接与盐酸反应产生二氧化碳。

2、坚决不可以 必须先+氯化钡，再+碳酸钠，+碳酸钠的目的除去溶液中的钙离子，还要除去上一步中加入的过量的钡离子。

3、要想处境除净杂质，必须加入过量除杂试剂，后面加入的试剂把前面加入的过量试剂除去。

4、实际上这不存在顺序。但为了方便理解和计算，才这样说。这“顺序”是这么来的：假设过氧化钠或氧化钠先和水反应生成氢氧化钠，可氢氧化钠要与二氧化碳反应生成碳酸钠。

到此，以上就是小编对于folin酚试剂原理的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。