检测AMPK蛋白应该用什么抗体（amp检测是什么意思）

摘要： 本篇目录：1、常用的免疫检验项目及临床意义2、...

本篇目录：

• 1、常用的免疫检验项目及临床意义
• 2、用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量是什么?
• 3、免疫检测方法
• 4、流式细胞仪检测项目
• 5、蛋白乙酰化如何检测?
• 6、风湿病的检验知识(2)

常用的免疫检验项目及临床意义

在临床意义上，病原体抗原和抗体的检测主要是用于判断相应病原体的感染状态(急性或慢性感染、病原体携带等)，一些如抗-HBs可用于疫苗免疫效果的判断。

针对各种自身免疫性疾病的临床实验室常用检测项目包括三类：自身抗体，常规检查，包括一般免疫功能、三大常规， 组织器官特异性功能指标。

人体免疫功能包括体液和细胞免疫功能，体液免疫功能主要检查免疫球蛋白（IgA、IgD、IgE、IgG、IgM）补体系统（CC4）等；细胞免疫功能主要检查T细胞亚群的功能，包括CDCDCDNK细胞的功能。

〖临床意义〗 免疫荧光法检查ANCA阳性一般分为两种荧光类型，一种是胞浆型，称为cANCA，一种是核周型，称为pANCA。cANCA产生弥漫性细胞浆染色，是针对PR3的抗体 ，一般见于wegener肉芽肿病(WG)，特别是肾和肺受累的病人。

【临床意义】年龄与血中Ig含量有一定关系。免疫球蛋白异常 （1）低Ig血症：有先天性和获得性二类。先天性低Ig血症，主要见于体液免疫缺损和联合免疫缺陷病。

用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量是什么?

1、考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青色，蛋白质-色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。

2、考马斯亮蓝（Coomassie Brilliant Blue）法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质—染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。这种蛋白质测定法具有超过其他几种方法的突出优点，因而正在得到广泛的应用。

3、考马斯亮蓝法测蛋白质含量是0～1 000μg/mL。考马斯亮蓝一定范围内与蛋白质浓度成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。测定含量：该方法用于大多数蛋白质的定量是比较精确的，但不适用于小分子碱性多肽的定量。

4、考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度，是利用蛋白质染料结合的原理，定量的测定微量蛋白浓度的快速、灵敏的方法。

5、简述考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的过程如下：试剂准备：考马斯亮蓝G-250染料需要提前溶解，通常使用乙醇和缓冲液混合配制。同时，需要准备标准蛋白溶液，用于制作标准曲线。

6、考马斯亮蓝G-250测定豆芽中蛋白质含量的原理是利用该染料与蛋白质结合后颜色的变化来测定蛋白质含量。在酸性溶液中，考马斯亮蓝以游离态存在，呈现棕红色。当它与蛋白质通过疏水作用结合后，颜色变为蓝色。

免疫检测方法

（4）化学发光免疫分析法（luminescentimmunoassay，LCIA）。LCIA又可分为化学发光免疫测定（chemiluminescentimmunoassay，CLCIA）和生物发光免疫测定（bio-luminescentImmunoassay，BLCIA）。

用酶免疫检测仪测量颜色的光密度，可定量测定抗原。间接法（indirecrELISA）常用于检查特异抗体。

酶联免疫检测是目前应用最广泛的免疫检测方法。该方法是将二抗标记上 酶，抗原抗体反应的特异性与酶催化底物的作用结合起来，根据酶作用底物后的 显色颜色变化来判断试验结果，其敏感度可达ng 水平。

流式细胞仪检测项目

1、流式细胞仪有以下功能：临床诊断：比如白血病、淋巴瘤的分型；造血干细胞的检测；TBNK和细胞因子的检测等。 实验研究：只要细胞或者微球的大小在流式检测范围内，都可以用流式来分析各种抗原的含量或代谢状态等。

2、贝克曼流式细胞仪是一种检测细胞表面分子和细胞内部结构的仪器，主要用于淋巴细胞亚群分析及绝对计数、HLA-B27的检测（强制性脊柱炎）以及血液病/淋巴瘤的免疫分型。

3、流式细胞仪技术，主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光，经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点，当每个细胞经过焦点时，发出一束散射光/或荧光。

4、流式细胞术(flow cytometry， FCM)是以流式细胞仪为检测手段的一项能快速、精确的对单个细胞理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。

蛋白乙酰化如何检测?

1、，4-二硝基苯肼是检测羰基的试剂。乙酰化就是将有机化合物分子中的氮、氧、碳原子上引入乙酰基CH3CO-的反应，最常见的是组蛋白乙酰化。常用氯乙酰和醋酸酐等作为乙酰化剂。

2、磷酸化，去磷酸化，乙酰化，去乙酰化等 如AMPK通过磷酸化激活PGC-1α，检测指标：磷酸化的PGC-1α Nrf2激活抗氧化酶；检测指标：抗氧化酶的mRNA水平 如果检测抗氧化酶的蛋白水平，能否说明Nrf2激活抗氧化水平？答案是不能。

3、蛋白质翻译后修饰（post-translationalmodifications，PTMs），如磷酸化、乙酰化、泛素化、SUMO化、糖基化等，大幅度的增加了蛋白质组的复杂性。

4、乙酰基化：当需要转录的时候，组蛋白乙酰基化酶来乙酰基化侧链N。乙酰基化的侧链N失去负电性，所以就没那么紧得盘绕着核小体，DNA聚合酶就可以开始转录。

5、用ChIP-Seq公共数据探索组蛋白表观遗传修饰参与目标基因的调控情况在生信研究中，各式的seq数据一直是深受生信人喜爱的研究样本来源。

6、双缩脲试剂检测 准备双缩脲试剂和待测样品。将双缩脲试剂A液和B液混合均匀。加入待测样品至双缩脲试剂中，充分混合。观察颜色变化，如果产生紫色反应，则说明样品中含有蛋白质。

风湿病的检验知识(2)

1、高水平 IgM-RF阳性病人预后较差。 从早期RA患者的X线片分析，IgM-RF持续阳性的病人更易发生骨侵蚀。IgA-RF在SS病人中阳性率较高；IgE-RF在恶性关节炎病人中阳性率较高。

2、CRP升高是体内“炎症”释放的信号，组织损伤、感染炎症、免疫炎症甚至肿瘤，均是激发体内“炎症”的按钮。因此 单纯通过检测CRP，对风湿病的诊断没有帮助，对诊断明确的风湿病的病情评估有一定判断意义。

3、问题二：类风湿病要做什么检查？ 意见建议：风湿全套是一个血液常规检验的组合，一般包括四项：风湿因子，类风湿因子，血沉，c-反应蛋白。

4、问题八：确诊风湿要做什么检查 自身抗体 在风湿性疾病的范围内应用于临床的自身抗体分以下四类：抗核抗体谱、类风湿因子、抗中性粒细胞浆抗体、抗磷脂抗体。对弥漫性结缔组织病的诊断有很大帮助。 (1)抗核抗体谱。

5、实验室检查 (1)一般检查 血、尿常规、血沉、C-反应蛋白、生化(肝、肾功能，A/G)、免疫球蛋白、蛋白电泳、补体等。

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