为什么用M缓冲液洗涤（实验中m缓冲液的作用）
摘要：
本篇目录：1、滴定中为什么要用缓冲液控制pH2、如何证明细胞中存在某种细胞骨架... 本篇目录：
滴定中为什么要用缓冲液控制pH
控制溶液的PH，减小EDTA的酸效应。缓冲溶液有时又可以作为络合掩蔽剂，降低共存离子效应。缓冲溶液有时用于防止金属离子水解形成不能迅速与EDTA络合的羟基化合物。
滴定要在缓冲溶液中进行是为了保持溶液在某一特定的pH值之内。滴定是指一种定量分析的手段，也是一种化学实验操作。它通过两种溶液的定量反应来确定某种溶质的含量。
【答案】：由于EDTA在滴定过程中随MY的生成会不断释放出H+，使溶液的酸度逐渐增大，有可能超出金属离子准确滴定所需要的最高酸度，不利于滴定进行，因此必须用缓冲溶液控制滴定体系的酸碱度在最高酸度和最低酸度之间。
为了保持溶液在某一特定的pH值之内。EDTA配位滴定金属离子必须在一定的PH值条件下进行，通常用缓冲溶液来稳定溶液PH值，配位滴定时如果不使用缓冲溶液，则配位反应无法进行，导致滴定失败。
随着滴定的进行，edta会逐渐释放出氢离子，因为酸效应会影响络合反应，所以要用缓冲溶液控制一定的PH。
酸度对配位滴定影响非常大，影响酸效应系数。
如何证明细胞中存在某种细胞骨架
证明细胞骨架存在的实验比较多。例如，在用秋水仙素处理细胞后，微管破坏，呈纺锤状的植物精子便变成球形，所以说微管起骨架作用，保持原生质体的一定形状。
细胞骨架在细胞的组成中占有重要地位。它是活细胞的支撑物质，维持细胞及核的形态，决定各细胞器及某些大分子的空间位置，并参与其位移活动；参与细胞内的 物质转运，细胞的收缩及伪足的运动，与细胞分裂活动有密切关系。
微管可在所有哺乳类动物细胞中存在，直径大于12nm，除了红细胞(红血球)外，所有微管均由约55kD的α及β微管蛋白(tubulin)组成。
它在细胞内形成一个框架结构，为各种细胞器提供附着位点，将细胞器组成各种不同的体系和区域网络，保证了各细胞器生命活动正常有序地进行。细胞骨架为细胞内的物质和细胞器的运输及运动提供机械支撑。
抗原抗体反应。通过将荧光素已知的抗体进行标记，并使其与抗原发生反应的方式来对细胞的骨架和细胞器等进行定位，被成为抗原抗体反应。细胞骨架是真核细胞中的蛋白纤维网架体系。
水的硬度测定为什么要加缓冲溶液?
因此在络合滴定中，通常需要加入溶液来控制溶液的pH值。
测定水硬度时，为什么要加入氨性缓冲溶液？一是钙镁与EDTA反应的pH不能太小，原因是EDTA有酸效应，酸度大时，形成的金属配合物不稳定，不能准确滴定。计算表明，pH≥10。所以需要控制酸度。
因为测水的硬度，是用络合滴定法滴定其中Ca^2+，Mg^2+量，而这两个金属离子与EDTA络合稳定常数不很大，允许的酸效应小，所以只能在pH9-10左右的缓冲液液中滴定，否则酸度太高，无法形成稳定络合物。
测定硬度时需要控制溶液的ph范围，而且络合ca离子需要在ph=10左右。
一个原因是EDTA往往不是Y4-形体，而是结合氢的形体，比如HY、H2Y等等。比如HY生成MY时，会释放出一个氢离子。大量氢离子的释放会导致pH降低。所以为了保持pH稳定在10左右，要加入氨-氯化铵溶液，使溶液pH稳定。
生物凝胶色谱柱的装填中为什么要加缓冲液?什么是洗涤平衡?
1、活化柱子，使里面有效基团经过缓冲液活化，提高分离效果和稳定性。
2、在凝胶色谱实验中，混合物首先被装载到凝胶柱中，然后通过加入缓冲溶液，使混合物得以在凝胶中运动。不同大小、形状、电荷和亲水性的生物大分子在凝胶中的运移速度不同，从而被分离。
3、装柱前要将色谱柱垂直固定在支架上。因为干的凝胶和用缓冲液平衡好的凝胶的体积差别很大，因此装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需要的凝胶量。实验一般使用的是交联葡聚糖凝胶 (sephadex g-75）。
4、溶胀 商品凝胶是干燥的颗粒，通常以40~63um的使用多。凝胶使用前需要在洗脱液中充分溶涨一至数天，如在沸水浴中将湿凝胶逐渐升温到近沸，则溶涨时间可以缩短到1~2小时。
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