DAPI是用来检测什么的（da检测是什么意思）

摘要： 3、双分子荧光实验中为什么还需要加入DAPI染色?...

本篇目录：

• 1、DAPI,TRITC,FITC是什么意思?
• 2、DAPI和hoechst染色的区别
• 3、双分子荧光实验中为什么还需要加入DAPI染色?
• 4、钙黄绿素可以用于固定细胞染色吗
• 5、测细胞凋亡,贴壁细胞dapi染色,还需要固定吗
• 6、dapi染色能否区分活死细胞

DAPI,TRITC,FITC是什么意思?

bf：正常光模式；fitc：异硫氰酸荧光素，是荧光染料；dic：微分干涉差模式；dapi：4，6-二脒基-2-苯基吲哚，是荧光染料；rhod：罗丹明，是荧光染料。

FITC（389g/mol）是用于荧光显微镜技术的首批染料，且其被当成AlexaFluor488等后续荧光染料的发端。该染料的荧光活性取决于它的大共轭芳香电子系统，而该系统受蓝色光谱中的光所激发。

②四甲基异氰酸罗达明（tetrametrylrhodarnine isothiocyante，TRITC）是一种紫红色粉末，较稳定，是罗达明（rhodamine）的衍生物。

DAPI和hoechst染色的区别

1、DAPI是含有特定AT序列DNA的一种嵌入剂，它能像Hoechst染料一样粘附在DNA双螺旋的小沟区。尽管DAPI不能通过活细胞膜，但却能穿透扰乱的细胞膜而对细胞核染色。

2、根据这些特性，用Hoechst 33342结合PI染料对凋亡细胞进行双染色，就可在流式细胞仪上将正常细胞、凋亡细胞和坏死细胞区别开来。

3、所以光看到蓝色荧光，无法区分。DAPI是一种能够与DNA强力结合的荧光染料，常用于荧光显微镜观测。类似于DAPI技术，赫斯特染色是一种既可以用于活细胞也可以用于固定细胞的蓝色荧光染料，并且可以使用与DAPI相同的机器滤镜设置。

4、主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。Hoechst是与DNA特异结合的活性染料，储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度，使用时用PBS稀释成终浓度为2~5mg/ml。DAPI为半通透性，用于常规固定细胞的染色。

5、DAPI溶液是半通透性的，不固定的话，细胞染色时间得长，染料进入细胞会比较少，所以建议是固定。DAPI 可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

双分子荧光实验中为什么还需要加入DAPI染色?

1、DAPI为一种荧光染料，可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光，和EB相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。

2、另外，因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

3、因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。在荧光显微镜观察下，DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。

4、细胞经热激处理后用DAPI染色3分钟，在荧光显微镜下可以看到到细胞核的形态变化。DAPI 是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处，一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。

5、因为DAPI可以透过完整的细胞膜，DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

钙黄绿素可以用于固定细胞染色吗

正常情况下，细胞必须首先“固定”以保存和维持目标表位的结构和位置，然后“通透”以允许探针，理想地进入所有细胞室（细胞质、线粒体、核糖体、细胞核等）。

于接种后第3天角膜上皮细胞在细菌纤维素膜上贴壁达到融合时加入10ml含5μl钙黄绿素-AM＋20μl溴乙非啶同二聚体的无菌PBS（LIVE／DEAD细胞活性毒性检测），评估2种培养法细胞的活性率。

钙黄绿素-AM(Calcein-AM)：Calcein -AM本身并不是荧光分子，但通过活细胞内的酯酶作用，Calcein -AM能脱去AM基，产生的Calcein能发出强绿色荧光（激发：490 nm，发射：515 nm）。

可以 Calcein-AM是一个易于穿透完整活细胞的非荧光性疏水化合物。进入细胞后，Calcein-AM被胞内酯酶水解产生钙黄绿素Calcein，后者是一种疏水的强荧光化合物，能够稳定保持在细胞质膜中。

钙黄绿素是荧光标记染料，茜素红不属于荧光标记染料。茜素红：酸碱指示剂，pH7(黄)～pH 2(紫)。显微染色剂，神经组织的活体染色，植物细胞学中染色体染色和检定颠茄碱的试剂。测定氟化物。

可以。钙黄绿素和PI染色并不会对细胞的存活产生直接的影响，因此细胞可以继续培养，不过可能会有副作用。

测细胞凋亡,贴壁细胞dapi染色,还需要固定吗

对于细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色，则先进行免疫荧光染色，染色完毕后再按后续步骤进行 DAPI 染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行后续的 DAPI 染色。

不需要**。单纯染DAPI不需要封闭通透。

用流式检测细胞凋亡的方法很多种，有些需要固定，有些不能固定的。根据方法而定，不能一概而言。如果是测细胞内抗原的，比如抗体识别活化caspase-3， 那就要固定。其他检测功能的，比如caspas3-3活性的，就要活细胞来测试。

DAPI染色实验流程：贴壁细胞的复染：1样品准备：使用恰当的固定剂固定样品。

dapi染色能否区分活死细胞

1、不能。DAPI对活细胞和死细胞都可以染色。

2、活死细胞dapi染色观察到蓝色荧光是活细胞 因为DAPI可以透过完整的细胞膜，DAPI能快速进入活细胞中与DNA结合，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

3、台盼蓝染色鉴别死活细胞的原理：活细胞不会被台盼蓝染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。台盼蓝染色后，通过显微镜下直接计数或显微镜下拍照后计数，就可以对细胞存活率进行比较精确的定量。

4、测细胞凋亡，贴壁细胞dapi染色，最好是固定。DAPI溶液是半通透性的，不固定的话，细胞染色时间得长，染料进入细胞会比较少，所以建议是固定。DAPI 可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。

5、因为DAPI可以透过完整的细胞膜，它可以用于活细胞和固定细胞的染色。在荧光显微镜观察下，DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。

6、DAPI 可以穿透细胞膜与细胞核中的双链DNA结合而发挥标记的作用，和EB相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。显微镜下可以看到显蓝色荧光的细胞，荧光显微镜观察细胞标记的效率高(几乎为100 )。

到此，以上就是小编对于da检测是什么意思的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。