Earle是什么溶液（ea什么溶剂）

摘要： 本篇目录：1、求助比较好的体外的神经细胞培养模型2、自噬的自噬的研究方法...

本篇目录：

• 1、求助比较好的体外的神经细胞培养模型
• 2、自噬的自噬的研究方法
• 3、细胞自噬研究策略
• 4、常用细胞培养基成分
• 5、细胞自噬

求助比较好的体外的神经细胞培养模型

．取出生后1-3天内的大鼠脑组织后，先仔细剥除脑膜和血管等纤维成分，置入Hanks液中漂洗1～2次后，置于30～50倍的Hanks液中，脑组织比较柔软，反复吹打即可制成细胞悬液。

N2a cells，也有人称其为Neuro-2a，是小鼠来源神经瘤母细胞。目前主要在实验室培养该细胞系作为体外病理研究的细胞模型。

每孔加入2ml的完全培养液继续培养。8． 隔日半定量换液，小心弃去悬浮细胞，轻轻转动培养板，防止细胞凝集。第七天收集悬浮细胞，做相关的实验。按照如此方法培养的细胞效果相当好。一般流式检测可以达到80％的纯度。

糖氧剥夺(Oxygen and glucose deprivation，OGD)模型：此法可模拟在体脑缺血模型，又称离体缺血模型。

你也可以用不同颜色的通条来制作神经元模型。1　拿一根通条，把它弯成一个圈，代表细胞体。2　再拿一根通条，把它剪成三部分，将这三部分缠在刚才做好的细胞体上，并使它们向细胞体的外侧展开。这些就是树突。

自噬的自噬的研究方法

酸性泛素酶法：利用酸性泛素酶的活性来间接评估自噬程度。该酶在自噬体中富集，可以通过染色或酶活检测方法来显示自噬体的存在和活性。

而且，各种类别的磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)用独特的方式控制自噬途径：IA 类的PI3K 抑制细胞质的汇集和降解，而Ⅲ类则刺激细胞质的降解，提示PI3K 家族是自噬途径关键的调控因子。

Calreticulin（钙网织蛋白）：内质网腔 （注意：这些蛋白均为胞浆蛋白，爬片或胰酶消化的细胞在做免疫荧光前需先透膜（permeablize），可采用0.1%SDS处理。

年 8 月 17 日，图卢兹大学综合生物研究中心 Arnaud Besson 教授团队，在期刊 Nature cell biology 中发表的自噬相关文章(图 1)，阐明了自噬与细胞周期调控的新机制。

细胞自噬研究策略

1、（三）自噬检测方法：细胞经诱导或抑制后，需对自噬过程进行观察和检测，常用的策略和技术有：1）Western Blot检测LC3的切割利用Western Blot检测LC3-II/I比值的变化以评价自噬形成。

2、寻找疾病模型；确定目的细胞；确定细胞的刺激源；体外培养该细胞，并施加该刺激源，检查细胞的变化（形态学，生物化学指标即可）；体内干预该刺激源，观察疾病变化（病理学，生物化学指标即可）。

3、自噬过程进行观察和检测 细胞经诱导或抑制后，需对自噬过程进行观察和检测，常用的策略和技术有：观察自噬体的形成 由于自噬体属于亚细胞结构，普通光镜下看不到，因此，直接观察自噬体需在透射电镜下。

4、检测细胞自噬可以采用多种方法。以下是一些常用的检测方法：转基因标记法：将绿色荧光蛋白（GFP）或相关探针与自噬相关蛋白（如LC3）融合，通过荧光显微镜观察细胞内的荧光信号强度和分布情况。

5、p27 调控细胞自噬 作者团队通过研究 p27+/+ MEFs 和 p27-/- MEFs 应对氨基酸剥夺后自噬的变化，证明了 氨基酸缺乏的细胞中，p27 促进自噬 。

常用细胞培养基成分

1、维生素：提供生物体所需的维生素，如维生素B族、维生素C等。 生长因子：对于某些生物体而言，需要添加特定的生长因子，如激素、生长因子等。

2、病毒培养基：动物病毒用鸡胚培养基(鸡胚)，植物病毒用植物组织培养(植物组织)。噬菌体用细菌培养基(大肠杆菌，牛肉膏，蛋白胨，无机盐。)。

3、血清中已知的成分主要有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等。蛋白质主要是白蛋白和球蛋白。氨基酸是细胞合成蛋白质的基本成分，氨基酸中有12种是细胞本身不合成的，必须由培养液提供。

4、培养基固体，2培养基成分蔗糖、氨基酸、维生素、水、矿物质、生长素、细胞分裂素、琼脂。动物细胞培养：1培养基液体，2培养基成分葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、水、动物血清。

细胞自噬

简单的来说，细胞自噬就是真核生物的细胞把自己一些已损坏的蛋白质或细胞器等“吃掉”，快速地提供能量和原材料来维持自身的正常运转（图2）。

细胞自噬(autophagy)是依赖溶酶体途径对胞质蛋白和细胞器进行降解的一种过程，在进化上具有高度保守性，广泛存在于从酵母、线虫、果蝇到高等脊椎动物的细胞中。

细胞自噬受基因组控制。细胞自噬是指在自噬相关基因的调控下，利用溶酶体降解自身受损的细胞器及大分子物质的过程，以此维持细胞自身的需要及细胞器的更新。

到此，以上就是小编对于ea什么溶剂的问题就介绍到这了，希望介绍的几点解答对大家有用，有任何问题和不懂的，欢迎各位老师在评论区讨论，给我留言。