iptg用什么溶解（lps用什么溶解）

摘要： 2、请问IPTG如何配置?AT克隆蓝白斑筛选用...

本篇目录：

• 1、化学试剂滴在地板上,用拖把拖了,但是试剂溶解了,到处都是黏在了地板上...
• 2、请问IPTG如何配置?AT克隆蓝白斑筛选用
• 3、IPTG用来筛选蓝白斑需要搭配什么使用啊,求告知啊,做了几次实验都失败...
• 4、1M的IPTG怎么配
• 5、如何制备LB/AMP/IPTG/X-GAI平板
• 6、iptg配方

化学试剂滴在地板上,用拖把拖了,但是试剂溶解了,到处都是黏在了地板上...

如果你用的是固体不是稀释液那也没好办法地面倒上一盆水后使劲儿擦吧没别的好办法，请酌情参考。IPTG我以前用过和APG差不多都是非离子糖苷表活，白色除了菌落不会与金属铁生成对人体有害的副产物请放心。

处理的办法是：撒硫磺粉，硫磺粉和水银在常温下可以反应生成“硫化汞”。可减少水银的危害，水银和硫磺反应比较慢，反应效果难以观察。

即使没有接触或误食草酸，草酸蒸汽也可能造成慢性中毒，当然这个剂量并不容易评估，不过草酸这种具有刺激性和腐蚀性的东西没有清除干净终究不是好事，最好进行更彻底地清除，还可以放一些碱性物质中和一下再清除。

请问IPTG如何配置?AT克隆蓝白斑筛选用

首先配置普通的培养基（LB或者SOB，SOC），然后高压灭菌后，让培养基冷却到60度左右，加入合适的抗生素（AMP等），接着倒平板。然后配置（20mg/ml）的X－gal（用二甲基甲酰胺溶解）和200mg/ml的IPTG（水溶）。

蓝白斑筛选是一种基因工程常用的重组菌筛选方法。野生型大肠杆菌产生的β-半乳糖苷酶可以将无色化合物X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和深蓝色的物质5-溴-4-靛蓝。

而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地破坏α片段的编码，使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，称为蓝白斑筛选。缺点 由于多种原因，一些白色菌落可能不包含所需的重组质粒。

蓝白斑筛选的机理 由α-互补产生的Lac+ 细菌较易识别，它在生色底物X-gal(5-溴-4氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)下存在下被IPTG(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)诱导形成蓝色菌落。

的作用下，在生色底物X-Gal存在时产生蓝色菌落。而当外源DNA插入到质粒的多克隆位点后，几乎不可避免地破坏α片段的编码，使得带有重组质粒的LacZ-细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，称为蓝白斑筛选。

IPTG用来筛选蓝白斑需要搭配什么使用啊,求告知啊,做了几次实验都失败...

1、首先把IPTG配制成24 mg/ml（100 mM）的水溶液，并进行过滤除菌后保存。

2、在重组质粒中插入片段使α-肽失活，可在指示平板上通过颜色筛选鉴别。不带 有插入片段的载体，表达有功能的β-半乳糖苷酶，所用的宿主菌在染色体或附加体上缺失掉lacZM15基因，导致内源α-肽失活。

3、IPTG是为了诱导乳糖分解相关酶的编码基因表达，使得培养基中的乳糖得以被分解产生半乳糖。X-gal一种酵母半乳糖苷酶显色底物，可以与分解产生的半乳糖结合生成蓝色物质，用于蓝白斑筛选。

4、-溴-4-靛蓝可使整个菌落产生蓝色变化。在经人工插入外源基因后，突变型大肠杆菌的β半乳糖苷酶基因被插入的外源基因切断，无法形成完整的β半乳糖苷酶，故不能对无色化合物X-gal进行切割，菌落呈白色。

5、使得带有重组质粒的细菌形成白色菌落。这种重组子的筛选，又称为蓝白斑筛选。如用蓝白斑筛选则经连接产物转化的钙化菌平板37℃温箱倒置培养12-16hr后，有重组质粒的细菌形成白色菌落。

6、半乳糖苷酶的α–互补性，可以根据是否呈现白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑选出基因重组体。此外，它还可以作为具有lac或tac等启动子的表达载体的表达诱导物使用。乳糖不是β–半乳糖苷酶的活性诱导物质，半乳糖才是。

1M的IPTG怎么配

IPTG是一种作用极强的诱导剂，不被细菌代谢而十分稳定，因此被实验室广泛应用。IPTG溶液的配制很简单：在8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后，用蒸馏水定容至10ml，用0.22μm滤器过滤除菌，分装成1ml小份贮存于-20℃。

首先把IPTG配制成24 mg/ml（100 mM）的水溶液，并进行过滤除菌后保存。

取1g IPTG溶于5ml双蒸水中，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，-20°C保存即可。

要将24mg/ml IPTG配成1mM浓度，可以按照以下步骤进行： 确定需要配制的iptg溶液体积，假设为100毫升。 计算需要多少克iptg，即100毫升*10*0.001*24mg，得出结果为0.0000024克。

就不能说明哪个条带是你的目的基因的特异表达。如果做目的基因不加诱导剂的对照的话，可以看出目的基因在不诱导下的本底表达水平。也可以看出诱导剂的作用。我们实验室就是那么做的，有时候还会加空菌(宿主菌)的对照。

先说第一个iptg的。1mmol/L其实就是1：1000。如果你有5ml的菌液，就加5uL的iptg 0.5M 就是 0.5mol/L。你洗脱液假如是1L，那就加0.5g的氯化钠。水溶液密度都是。。所以。。

如何制备LB/AMP/IPTG/X-GAI平板

1、这个平板是用来做大肠杆菌的蓝白斑筛选转化子用的。

2、LB/Amp/IPTG/X-gal 培养基在含 100 g/mL Amp 的 LB 琼脂平板上加入 40 L X-gal 贮存液和 40 L IPTG 溶液，用无菌玻璃涂布器把溶液均匀涂布于整个平板表面，超净工作台上吹干后备用。

3、一般是配好的amp+LB板，涂板的时候把x-gal 40ul（20mg/ml），IPTG 4ul（200mg/ml）加入到菌液里，然后混匀涂板。也可以先涂到板上在涂菌。

4、当有外源DNA片段插入到位于lacZ中的多克隆位点后，就破坏了α肽链的阅读框，从而无法形成α互补，不能产生具有功能活性的β半乳糖苷酶，因此含有外源DNA片段的重组子的克隆在涂有IPTG和X-gal的培养基平板上是白色菌落(图4-4)。

5、方法一：细菌转化的方法多以Mendel和Higa（1970）的发现为基础，其基本方法是用冰预冷的CaCl2或多种2价阳离子等处理细菌，使之进入感受态得以转化。用CaCl2制备新鲜或冷冻的大肠杆菌感受态细胞，常用于成批制备感受态细菌。

6、所以菌落颜色成白色。因此，将外源基因克隆进pUC18后，并将其转化入不含有Amp抗体基因和LacZ基因的E.coli菌株中，将其生长在LB/Amp(IPTG+， x-gal+)的培养基上，选择白色的菌落即含有你的目标克隆片。

iptg配方

首先将PMSF和IPTG放置于通风橱中，准备好异戊醇（或无水乙醇），超纯水，移液器，配套枪头，合适的干净无菌容器。将PMSF粉末10mg/ml溶于异丙醇（或无水乙醇）中，因为PMSF溶解在水中较不稳定。

取1g IPTG溶于5ml双蒸水中，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，-20°C保存即可。

IPTG：8ml蒸馏水中溶解2g IPTG后定溶至10ml，0.22um滤器过滤除菌，分装，-20 oC保存。 Z $J#| X-gal：用二甲基甲酰胺溶解X-gal配制成20mg/ml的贮存液，保存时防光破坏，-20 oC保存，无须过滤除菌。

也溶于DMF200mg/ml IPTG 在0.8ml蒸馏水中溶解0.2g IPTG后，用蒸馏水定容至1ml，用0.22μm滤器过滤除菌，贮存于-20℃。

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