电泳拖尾什么原因(电泳有拖尾现象的原因)
本篇目录:
- 1、电泳时,为何带出现拖尾?
- 2、pcr产物跑的电泳,为什么DNA都有拖尾
- 3、pcr产物在电泳仪中跑胶出现拖尾现象是怎么回事
- 4、电泳图如下,marker有拖尾现象,是怎么回事
- 5、...经电泳检查,发现有拖尾现象,其可能的原因是什么?
电泳时,为何带出现拖尾?
A:主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;电泳缓冲液时间过长,重新配制;降低凝胶浓度。Q:为什么带出现纹理现象?A:主要是样品不溶性颗粒引起的。
由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物过多。
很可能是胶没煮好!煮的时候要沸腾三次,摇匀,不然胶的密度不均一。电压,电压过高也会拖带 可以适当提高电泳槽里面的缓冲液浓度。如果还是不好,可以换一个稍微宽一点的梳子,一般效果会好很多。
mg2+在pcr反应中发挥了重要作用,mg2+浓度越高,taq酶活性越强,条带越亮,但非特异性也较强,杂带越多;mg2+浓度过低则影响pcr扩增产量,甚至使pcr扩增失败而没有扩增条带。
pcr产物跑的电泳,为什么DNA都有拖尾
1、PCR产物电泳拖尾,可能有如下原因: a.模板不纯。b.退火温度偏低。c.酶量过多,dNTP、Mg2+浓度偏高。d.循环次数过多。解决办法:a.纯化模板。b.适当提高退火温度。c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度。
2、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。电泳体系的问题:(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液。
3、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。电泳体系的问题:(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液。
pcr产物在电泳仪中跑胶出现拖尾现象是怎么回事
1、加样量过大。过多的量会造成加样孔超载,从而导致拖尾和弥散,对于较大的DNA此现象更明显。9制胶过程中胶孔没 制好。10 EB没有冲洗干净。11模板混有基因组DNA,或模板中混有蛋白。12非特异反映。
2、PCR产物出现拖尾的因素有很多,总结为一条,就是非特异性扩增过多。
3、原因有以下:可以考虑是不是样品不纯,目的产物与杂带相差不大,所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。
4、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。电泳体系的问题:(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液。
5、可能是产物降解,也可能引物、模版的量上的比较大。
6、你的PCR反应体系中没有加MgCl2吗?Mg2+在PCR反应中发挥了重要作用,Mg2+浓度越高,Taq酶活性越强,条带越亮,但非特异性也较强,杂带越多;Mg2+浓度过低则影响PCR扩增产量,甚至使PCR扩增失败而没有扩增条带。
电泳图如下,marker有拖尾现象,是怎么回事
1、电泳条件不理想:电泳时,电压、电流、电泳时间等参数可能会影响Marker的分离效果。如果电泳条件不合适,可能会导致Marker不整齐。
2、首先,点样孔很亮,说明样品有蛋白污染,其次,条带出现笑脸,有拖尾,是电压过高所致,建议减小电压,一般用90V电压跑,您可以试一下,如果还是出现拖尾可以将电泳槽放在冰上跑。
3、主要原因可能有以下几点:DNA上样量是否过大,可适当减少上样量;电泳参数的设置是否合适,可适当调整电压及胶浓度;产物是否特异,如是否存在非特异性产物等。
4、Q:为什么溴酚蓝不能起到指示作用?A:我们在实验中常会遇到溴酚蓝已跑出板底,但蛋白质却还未跑下来的现象。主要与缓冲液和分离胶的浓度有关。处理办法:更换正确pH值的Buffer;降低分离胶的浓度。
...经电泳检查,发现有拖尾现象,其可能的原因是什么?
1、PCR产物电泳拖尾,可能有如下原因: a.模板不纯。b.退火温度偏低。c.酶量过多,dNTP、Mg2+浓度偏高。d.循环次数过多。解决办法:a.纯化模板。b.适当提高退火温度。c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度。
2、PCR产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。电泳体系的问题:(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液。
3、Mg2+在PCR反应中发挥了重要作用,Mg2+浓度越高,Taq酶活性越强,条带越亮,但非特异性也较强,杂带越多;Mg2+浓度过低则影响PCR扩增产量,甚至使PCR扩增失败而没有扩增条带。
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